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技術文章/ article
組織樣本一般是制成組織勻漿,處理方法如下:1.取適量組織塊,于預冷PBS(02mol/L,pH7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);2.可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10ml預冷PBS(組織與PBS的質量體積比建議為1:5,即1g樣本加入5mlPBS)進行充分研磨(有條件實驗室可選用機器勻漿),該過程需在冰上進行;得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反...
細胞復蘇、傳代與凍存的操作流程復蘇1)將恒溫水浴鍋中的水預熱到37℃;2)準備一支15ml離心管,加入5ml含10%FBS的完quan培養基,放入37℃水浴鍋中預熱;3)戴上護目鏡,厚毛線手套后,從液氮罐中取出要復蘇的細胞,盡快轉入37℃恒溫水浴鍋中復溫晃動凍存管以提高復溫速率;4)將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,混勻后,1000rpm離心5min;5)準備一個T-25培養瓶,寫上細胞名稱、日期,再加入4ml完quan培養基;6)離心完成后棄去上清,用1ml完...
ELISA檢測試劑盒試驗溫育解讀在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加酶結合物和顯色劑后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育。溫育的時間選擇:溫育這一步是ELISA測定中最容易出現問題的步驟。目前國內ELISA試劑盒的反應溫育時間為37℃30分鐘-1小時,進口ELISA試劑盒則通常為37℃1-2小時才能有較wan全的結合,低于1小時,可能會影響測定下限。ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表...
羊包蟲病(HD)試劑盒中的抗原、抗體以及其他試劑成分經過特殊處理和優化,具有良好的穩定性。在適當的保存條件下,如按照規定的溫度范圍儲存,試劑盒可以在較長時間內保持其檢測性能的一致性。這使得試劑盒便于儲存和運輸,能夠在不同地區的養殖場、實驗室等場所廣泛使用,保證檢測結果的可靠性不受地域和時間因素的過度影響,有利于在全國范圍內開展羊包蟲病的監測和防控工作。羊包蟲病(HD)試劑盒的優點:(一)高敏感性能夠檢測出羊體內低濃度的包蟲特異性抗體。即使是在羊感染包蟲病的早期,當寄生蟲數量較...
檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被磷脂酶B(PLB)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的磷脂酶B(PLB)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000...
檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被番茄紅素(Lycopene)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的番茄紅素(Lycopene)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,...
檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被紅細胞原卟啉(EP)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的紅細胞原卟啉(EP)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,30...
1.手工洗板:操作步驟:每次反應溫育后,將反應液吸出或甩干,然后在板孔中加滿洗液,放置2~3分鐘,再將洗液吸出或甩干并用吸水紙拍干。重復洗滌3~4次,最后拍干。注意事項:洗液量:加入的洗液量應以剛滿反應孔為限,避免孔口內有游離酶未洗凈。避免孔間污染:吸液或甩干時要垂直,避免交叉感染。吸水紙:使用一次性吸水紙,選擇不易脫落碎屑的材質。拍干:拍干時用力要輕,避免抗原抗體復合物脫落,且時間應盡量短以防止酶失活。2.洗板機洗板:優勢:速度快,條件恒定,人為因素少。操作要點:洗滌參數:...
ELISA檢測試劑盒是一種常用的生物分析技術,用于定量或定性檢測樣本中的特定抗原或抗體。以下是其基本測定步驟:1.準備試劑與樣本:-根據試劑盒說明書,準備所需的所有試劑,包括標準品、酶標抗體、底物、洗滌液等。-將待測樣本按照要求進行稀釋或預處理。2.包被抗原或抗體:-在微孔板中加入適量的捕獲抗體(如果是間接法,則可能是抗原),并孵育一定時間,使抗體與微孔板結合。-洗滌去除未結合的成分。3.加入樣本與標準品:-向已包被的微孔中加入待測樣本和不同濃度的標準品,確保每個孔中的體積一...
微生物菌種可以彌補常規飼料中容易缺乏的氨基酸,還能使其它粗飼料原料營養成份迅速轉化,達到增強消化吸收利用效果。下面分享微生物菌種的培養:1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業發酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。...